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Primary 2

primary chondrocytes culture(연골 세포 배양)

연골세포를 배양하기 위해선 임신 15일차의 쥐에서 배속에 아기가 필요하다. 위 사진처럼 임신 쥐를 머리를 고정시켜준 후 꼬리를 잡아당겨 경추탈골 시켜준 후 1.배속에 아기들을 꺼내고 하반신을 잘라 준다. 2.잘린 하반신을 PSA(4’c)에 담가 둔다. 아래 그림을 보면 우리가 필요한 뼈는 Tibia, 와 Femur이다. 실제로 잘린 하반신을 현미경으로 보면 이렇다. 100파이 dish에 PSA를 넣어 놓고 현미경으로 보면서 작업을 하면 좋다. 3. 하반신의 Forceps으로 닭다리살을 바르듯이 발라 준다. 생각보다 뼈가 물컹하니 조심해서 발라준다. 뼈가 부러져도 상관없으니 천천히 하면 된다. 어느정도 발라 줬으면 아래 사진처럼 나올 것이다. 우리가 배양하는데 필요한 세포들은 저 빨간색 동그라미에 있다. ..

LAB 2020.03.22

Primary mixed glia preparation (Mixed glia prep 후 세포배양)

+준비물 : autoclave 된 수술 도구, 토치, 수술 도구 소독 용 70% Et.OH을 담은 비커, 70% Et.OH를 10ml 담은 petri dish 2개, DMEM 담은 10ml 100π dish 2개 1. 생후 2일 ICR mouse 준비. (어미 1마리당 새끼 8-12마리) 2. 쥐를 70% Et.OH에 살짝 담가 소독한 후 소독한 가위로 목을 자른다. 3. 70% Et.OH를 담은 petri dish에 담가 피를 뺀다. (오래 담가두지 말 것) 4. 10% DMEM에 담근다. 5. 코 부위를 소독한 핀셋으로 잡고 목 쪽 빈 공간에서부터 일직선으로 위로 자른다. (자를 때는 살짝 들어올리는 느낌으로) 목 쪽 빈 공간에서부터 중앙에서 양 귀 부분을 가로로 자른다. (바깥 쪽으로 밀 듯) 6...

LAB 2020.03.20
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